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双层父母感言

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我是温氏养鸡的养户,帮温氏养了五年的鸡,苦不说,连当初建鸡舍借的钱也还不上,不想给他养了,想终止,

买卖合同取决自觉自愿,即便合作也在于双方能否达成一致继续合同内容,如果出现无法继续的情况,双方自己协商可以接触合同不需要理赔。

如果在合同内容里出现有不公或者私吞现象,解除合同的时候可以要求理赔按照合同内容。

如调节不成可以直接起诉请求法律支援。

建议你协商解决就行,对方必须做出赔偿如果你的情况属实。

如果不成可以直接起诉要求赔偿。

对你非常有帮助。

请采纳。

什么是直肠管状腺瘤

满意答案一骑红尘6级2009-11-29 腺瘤是腺上皮组织的良性肿瘤,生长缓慢,无疼痛及其他自觉症状,体积小,直径多在2cm以内,界限多清楚,可活动。

病理改变中肉眼观察:有完整包膜,表面光滑。

剖面呈棕黄色,可有大小不等的囊腔,内含粘液。

显微镜观察:实质:肿瘤由柱状或立方上皮组成,双层排列,并互相吻合成不规则的小管状或狭长的小梁状。

细胞核大,卵圆形,大小一致,胞浆嗜酸性。

管腔或小梁外周无肌上皮细胞。

管腔内含PAS阳性分泌物。

间质:疏松,其中有大量毛细血管和小静脉。

实质和间质间有基底膜分隔。

多见于肠道、乳腺、甲状腺、卵巢等处。

粘膜的腺瘤多呈息肉状,腺器官内的腺瘤则多呈结节状,且常有被膜,与周围正常组织分界清楚。

腺瘤的腺体与相应正常组织腺体结构相似,而且常具有一定的分泌功能。

根据腺瘤的组成成分或形态特点,又可将之分为管状腺瘤、绒毛状腺瘤、囊腺瘤、纤维腺瘤、多形性腺瘤等类型。

(一)管状腺瘤与绒毛状腺瘤:多见于结肠、直肠粘膜。

呈息肉状,故常称为腺瘤性息肉。

两种成分都有时,称为管状绒毛状腺瘤。

腺瘤可有蒂(与粘膜相连,但也可以是比较平坦的。

绒毛状腺瘤恶变率较高。

(二)囊腺瘤:是由于腺瘤的腺体分泌物淤积,腺腔逐渐扩大并互相融合的结果,肉眼上可见到大小不等的囊腔。

常发生于卵巢等部位。

提问者 的感言: 谢谢。

2009-11-30

去旅顺博物馆的心得体会

一触即发yīchù jí fā[释义] 触:碰。

就。

原指把箭扣上;拉开弓射出去。

比喻事态发展到了十分紧张的阶段;稍一触动就立即会爆发。

[语出] 宋·张咏《乖崖集》:“鯸鮧愤悱;迎流独逝;偶物一触;厥怒四起。

”[正音] 发;不能读作“fà”。

[辨形] 即;不能写作“既”。

[近义] 箭在弦上 剑拔弩张 千钧一发[反义] 引而不发[用法] 比喻事情已经到了相当紧张的程度。

一般作谓语、宾语、定语。

[结构] 连动式。

求100字作文4篇100字读后感2篇

100字作文... 1 难忘的亲情 难忘的亲情我的脑海里有许多小鱼,这些小鱼构成了我难忘的亲情,但我最难忘的亲情是那一条金色的小金鱼…… 记得我读三年级的时候,刚过完年去上学,同学们兴高采烈地谈论着春暖花开的美好,可是,我不觉得有什么好。

因我在料峭春寒中上学,早晨我冷得牙齿打颤。

班上的同学说“你看,她的嘴唇发青。

”过了几节课,我回到家里很是不舒服,并躺倒床上睡着了。

我在睡觉中听到一种熟悉的声音,“快起来

小琬

”醒来一看是妈妈。

我说:“我好象有点发烧。

”妈妈赶紧给我用体温表一量,“体温四十度”妈妈立刻紧张起来。

给我的班主任打电话请假,接着,妈妈手忙脚乱拿起杯子到水给我喝退烧药,我仔细的发现妈妈的额头上有豆大的汗珠子直往下滚。

我想,妈妈这肯定是急出来的,我一定要病好早点。

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我不知怎么高烧不退,喝艘┖沽麂け常

读书笔记好词好句好段感悟

《童年》   好词摘录:  忽如其来、飘忽、兴趣盎然、熠熠生辉  好句摘录:  伏尔加河蓝色的水面上,桔红色的轮船在逆流而上,而一张张金色的叶片则缓缓顺流漂下。

  我非常害怕外祖父,总觉得他的绿眼珠无时无刻不在盯着我看。

  那曲子激昂中含着忧伤,仿佛是从高山奔流而下的河水,激荡在房间中。

  经常有人听见了他们的歌声从窗户底下停下来看着他们,那一张张仰起的面孔让我想起没洗的脏盘子。

  好段摘录:  “唉,你们这些人啊……

”他常常这样忽如其来地叹气,也不知在感叹什么。

“人啊……”的尾音总是被他拉得长长的。

  茨冈脸色红红地走到厨房中间,像一团火焰般地跳动起来:两手高高扬起,脚步快得让人难以分辨,衬衫抖动着,像燃烧一般发出灿烂地光辉。

他放纵地舞着,仿佛打开门让他出去他就能跳遍全城

大家都被他感染,跟着他颤动起来。

  歌唱中,外祖母时而前进,时而后退,时而飞旋,青春瞬间回到了她的身上,令她呈现出一种鲜花绽放般的美丽。

每个人都被她吸引住了。

  我的感想:  作者将主人公当时所处的肮脏的环境写得很到位,在语言描写上很有功夫。

使文章生动,令人身临其境,对美与丑及人复杂的感情有了更深层次的了解。

  鲁滨逊飘流记》中的好词好句好段  好词摘录:  搁浅、兜底、吞噬、烟波弥漫、泅水、山坳、恭顺、惊魂甫定、斑斑印记  好句摘录:  我简直吓坏了,呆呆地占在那里,就象挨了一个晴天霹雳。

  看到这情景,我怒不可遏,早把恐惧置之度外。

我在心里发誓:下次再看到这种暴行,一定不放过他们

  好段摘录:  这里地上结满了许多瓜类,树上挂满了一串串的葡萄,有数有大,还有黄灿灿的柠檬。

我顺着果园的斜坡望去,到处是一片清新翠绿的美景,这是我心里充满了喜悦,顿时感到自己成了这块富饶的土地的无可争辩的主人。

  

【第1句】: 开始做一件事的时候,若不是预先计算一下需要多少代价,若不是预先对自己的力量做一个正确的估计,那真是太愚蠢了。

  读《鲁滨逊漂流记》有感  全篇着重描写了鲁滨逊在荒岛上通过自己的劳动克服重重困难,最终战胜了恶劣的环境,与土著人星期五共同回到了家乡,过上了幸福生活的故事。

  我最欣赏的不是鲁滨逊的勤劳与勇敢,而是他那惊人的心理承受能力。

可想而知,一个孤零零的大活人独自在荒岛上生活了十几年,没有人陪伴他,甚至于最基本的,与一个人简简单单地说会儿话都做不到。

整个荒芜的岛上没有房屋,没有稻田,只能靠他自己辛辛苦苦地打造出一片天地  昆虫记之七—— 装死专家步甲 作者 法布尔  优美词语  引以为傲、不屑一顾、恭敬、火冒三丈、攻势、、逃之夭夭、得意洋洋、苦涩、侥幸、惟恐、履行、自言自语、伎俩、威慑、荒谬、唯唯诺诺、喧闹、一言不发、胆怯、挺身而出、毫不畏惧、晕厥、火势、千姿百态、愚蠢、卑鄙、虐待、毛骨悚然、筋疲力尽、昏迷不醒、蜷缩、怜悯、愤怒、难以忍受、争先恐后  精彩句段  我们不知道什么叫死亡,所以我们不会做出装死的行为

不管遭受什么样的虐待,我们始终是正直的昆虫,绝对不会做出欺骗他人的行为。

  别说是因为我们不会飞,才想出装死的伎俩

别说是因为我们跑不快,才想出装死的伎俩

我们根本不知道什么是死亡,所以不会做出装死的行为

  尤其是自杀,连想都没有想过

那种愚蠢的事情,只有卑鄙的人才会做出来

  读后有感  强者也会偶尔的躲避着比自己厉害的对手,以免的丢掉自己的性命。

作者 对步甲昆虫的了解很透彻,步甲虫装死是它抵御不了对方时的一种自卫的方式,孩子,在这个世界上无论是人类还是其他动物就像本书中叙述的昆虫为了自身的安全,必须得有自我保护能力,要有自我防卫能力,只有这样,你才能在这个错综复杂的世界安全自在地生活着,正所谓“害人之心不可有,防人之心不可无。

”  《范爱农》:  好词:迫害、遭遇、妥协、悼念、容光焕发、筹集川资、坚执、淡薄  从此我总觉得这范爱农离奇,而且很可恶  第二天爱农就上城来,戴着农夫常用的毡帽,那笑容是从来没有见过的。

  感悟:文章一开头,作者就用平凡又朴素的语言,记叙了他曾经在茶馆认识范爱农的事,先抒发自己对他的憎恶,为后文写对他的亲切友善作铺垫。

欲扬先抑的写作手法十分到位,朴素却又不失精练的语言,为我们展现了鲁迅先生对死国难者的同学们的一种同情,一种责任。

  :《猫狗鼠》  好词:媚态 玩弄 嗥叫 嫉妒 动辄获咎 博大 装潢 希图冒充  猫对自己捉到的猎物,总是尽情玩弄够了才吃下去  它与狮虎同族,却天生一副媚态  它吃了我小时候心爱的一只小隐鼠,虽然后来证实并非猫所为,但我对猫是不会有好感的  人呢,能直立了,自然是一大进步;能说话了,自然又是一大进步;能写字作文了,自然又是一大进步。

然而也就堕落,因为那时也开始了说空话。

  感悟:《猫狗鼠》从中可以看出鲁迅愤激的性格以及睚眦必报的狭小胸肠,斗争或反抗意识却谈不上,或者也可看出儿时的鲁迅有爱心,但长大了因为世故的精神而变得冷漠和无动于衷,但正因为如此,鲁迅却是懂得自省的人,这正是他的伟大之处,深刻的自我剖析,看到自己的渺小。

  《海底两万里》  熠熠生辉 奇幻莫测 震耳欲聋 美不胜收 惊天动地 无穷无尽 屹立不动 毛骨悚然 寸步难行 英姿 精确 荒寂 沸沸扬扬,残酷,破损零散,沸腾的水流,光彩夺目、瑰丽无比  尼摩船长说了一句话:人类进步的实在是太慢了.  毫无疑问,如果我们追赶的那个怪物,真的跟尼德•兰的鱼叉相碰,我决不敢打赌,保证这个怪物无事。

  读后感 这部小说,给了我极大的震撼。

它告诉了我许多我不了解的美丽岛屿;它让我了康塞尔是何等的忠诚;还告诉了我许多我在课本上学不到的知识。

作者在海底遨游,能看见许多珍贵的鱼儿,又能经历许多希奇古怪的事

简述石蜡切片术的制作过程

光学标本的技术

【实验目了解光学显微镜切片制作技术的方法步骤。

【实验原理】采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构,在自然状态下是无法观察清楚的,多数动、植物材料都必须经过某种处理,将组织分离成单个细胞或薄片,光线才能通过细胞。

为了适应这个需要,就产生了光学显微镜制片技术。

光学显微镜的制片技术方法可分为两大类:一类是非切片法,另一类是切片法。

非切片法,是用物理或化学的方法,使细胞彼此分离,如有分离法、涂布法、压碎法等。

非切片法的操作比较简单,能保侍细胞的完整,但是细胞之间的正常位置往往被更动,无法反映细胞之间的正常联系。

它可以与切片法配合使用,各取其长处。

切片法,是利用锐利的刃具将组织切成极薄的片层,材料须经过一系列特殊的处理,如固定、脱水、包埋、切片、染色等,过程十分繁复。

在制作过程中,还要经过一系列的物理和化学的处理,这些处理方法可根据各种不同材料的性质要求进行合理选择。

切片法虽然工序繁琐,技术复杂,但是,它最能保持细胞间的正常的相互关系,能较好和较长时间地保留细胞的原貌,所以仍然是光学显微镜的主要制片方法。

【实验仪器、材料和试剂】(一)仪器:石蜡切片机、恒温蜡箱、载玻片、盖玻片(二)材料:洋葱根或小鼠肝(三)试剂:乙醚、无水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、重铬酸钾、锇酸、正丁醇、二甲苯、石蜡、甘油、鸡蛋、纱布、加拿大树胶、麝香草酚

【方法与步骤】光学显微镜切片制作技术最简单的切片法是徒手切片,但是由于组织块往往十分柔软,18切削很困难,而且无法得到十分菲薄的切片,因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用,并将整个组织块包住,然后再用精密的切片机制作切片,才能获得良好的效果。

这种方法称为包埋法,包埋的物质称为包埋剂。

常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等,水和塑料也可作为包埋剂。

根据包埋剂的不同,分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等,它们各有长处,可以根据需要选用,但是使用得最多的还是石蜡切片技术。

石蜡作为包埋剂,有其独特的优点,例如:石蜡能切出极薄的蜡片(2~10μm);切片时能连成蜡带,便于制作连续切片;操作较容易,组织块可以包埋在石蜡中长期保存。

然而石蜡切片的制作过程较长,步骤很多,一步不慎往往导致前功尽弃,而且这些处理引起组织块或多或少地收缩,切片时受湿度影响比较大,这些不足之处必须在制片过程中认真对待,尽量减小它的不良影响。

石蜡切片的制作过程主要包括:取材,固定,脱水,透明,透蜡,包埋,切片,贴片,染色,透明,封藏等步骤。

1.取材材料的好坏直接影响到切片的质量,无论取哪一种动植物材料,以下几点是必须注意的。

(1)植物材料选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分;动物材料取用时常对动物施以麻醉,常用的麻醉剂有氯仿和乙醚,或将动物杀死后迅速取出所需要的组织。

(2)取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要,应该尽可能割取生活着的组织块,并随即投入固定液。

(3)切取材料时刀要锐利,避免因挤压细胞使其受到损伤。

(4)切取的材料应该小而薄,便于固定剂迅速渗入内部。

一般厚度不超过2mm,大小不超过5×5mm2。

2.固定组织和细胞离开机体后,在一定时间内仍然延续着生命活动,会引起病理变化直至归于死亡。

为了使标本能反映它生前的正常状态,必须尽早地用某些化学药品迅速地杀死组织和细胞,阻抑上述变化,并将结构成分转化为不溶性物质,防止某些结构的溶化和消失。

这种处理就是固定。

除了上述作用外,固定剂会使组织适当硬化以便于随后的处理,还会改变细胞内部的折射系数并使某些部分易于染色。

固定剂的作用对象主要是蛋白质,至于其他成分如脂肪和糖,在一般制作时不加考虑,如要观察这些物质,可用特殊的方法将其固定下来。

固定剂的作用表现在对材料体积的改变、硬化的程度、穿透的速度以及对染色的影响等方面。

这些作用的好坏、大小,都依所固定的材料性质而定,同样一种固定液对某一材料来说是良好的,但对另外一些组织可能就不很适用。

良好的固定剂必须具备的特征是:穿透组织的速度快。

,能将细胞中的内含物凝固成不溶解物质,不使组织膨胀或收缩以保持原形,硬化组织的程度适中,增加细胞内含物的折光度,增加媒染和染色能力,具有保存剂作用。

固定剂有简单固定剂和混合固定剂的划分。

简单固定剂即单一的固定剂,常用的有乙醇、甲醛、冰醋酸、升汞、苦味酸、铬酸、重铬酸钾和锇酸。

其中,苦味酸、升汞、铬酸既能凝固细胞清蛋白,又能凝固核蛋白;乙醇只能凝固清蛋白,而醋酸只能凝固核蛋白;甲醛、饿酸和重铬酸钾对这两种蛋白质都不凝固。

简单固定剂的局限性较大,如将其适当混合,制成复合固定剂可以取得更好的效果。

常用的混合固定剂有:Bouin液(70份苦味酸饱和水溶液+25份4%甲醛+5份冰醋酸)、Zenker液(升汞5g+重铬酸钾

【第2句】:5g+硫酸钠

【第1句】:0g+5ml冰醋酸+100ml蒸镏水)、Carnoy改良液(3份无水乙醇+1份冰醋酸)等。

固定剂的种类甚多,我们必须依据各种固定剂的性能及制片的不同要求来加以选择。

19固定时,须注意以下几点:(1)固定剂应有足够的量,一般为组织块体积的10~15倍。

(2)如所固定的材料外表有不易穿透的物质,可将材料先在含乙醇的溶液中固定几分钟,再移入水溶性的固定液。

(3)材料固定后如不立即下沉,可将其中气泡抽出。

(4)固定时间依材料大小、固定剂种类而异,可从1小时到几十小时,有时中间需要更新固定剂。

某些固定剂对组织的硬化作用较强,作用时间应严加控制,不能过长。

(5)一般固定剂都以新配制的为好,用过的不能再用。

有些混合固定剂由甲、乙两液合并者,一定要在使用前才混合。

(6)固定完毕,根据所用固定剂的不同,用水或乙醇冲掉残留的固定剂,以免固定剂形成沉淀,影响以后组织块的染色。

3.脱水生物组织中含有大量的水分,它和石蜡是不能相溶的,致使在包埋时石蜡无法渗入组织内部,因此须使用脱水剂将水分除尽,这就是脱水的作用。

脱水剂必须能与水以任何比例相混合。

脱水剂有两类:一类是非石蜡溶剂,如乙醇、丙酮等,脱水后必须再经过透明,才能透蜡包埋;另一类是兼石蜡溶剂,如正丁醇,脱水后即可直接透蜡。

常用的脱水剂是乙醇,因为它价格便宜,易于得到。

为了避免剧烈的扩散引起的组织的强烈收缩,脱水步骤应从低到高以一定的浓度梯度来进行,一般组织从30%乙醇开始,经过50%、70%、80%、95%、100%至完全脱水;对于一些柔软的组织应从15%开始。

脱水时间依据组织的类型和大小而定,一般各级乙醇中放置45min到1h,如果中间须停顿,应使材料停留在70%乙醇中,因为低浓度乙醇易使组织变软、解体,高浓度乙醇有脆化组织作用,放置时间不能过长,另外,脱水必须在有盖瓶中进行,以防止高浓度乙醇吸收空气中水分导致浓度降低而使脱水不彻底。

需要保存的材料可脱水至70%乙醇时停留其中,如需长期保存,可加入等量的甘油。

丙酮也是很好的脱水剂,其作用和用法与乙醇相同,不过其脱水力和收缩力都比乙醇强。

甘油常用于藻类、菌类及柔弱材料的脱水。

二氧六环为无色的石蜡溶剂,对组织没有收缩及硬化等不良后果,但其蒸气有毒,使用时须小心。

正丁醇可与水及乙醇混合,亦为石蜡溶剂,其优点是很少引起组织块的收缩与变脆。

叔丁醇的性质、作用和用法同于正丁醇,但因其价格昂贵而很少使用。

4.透明组织块用非石蜡溶剂脱水后必须经过透明。

透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合,它取代了脱水剂后,石蜡便能顺利地渗入组织。

透明剂的种类很多,较常用的是二甲苯、甲苯、苯、氯仿、香柏油和苯胺油等。

二甲苯作用较快,透明力强,但组织块在其中停留过久,容易收缩变脆变硬,同时若脱水不净,就会引起不良后果,在应用时必须特别小心。

通常将组织块先经纯乙醇与二甲苯的等体积混合液,再进入纯二甲苯,这样可减少上述的缺点。

透明时间应由组织大小而定,—般各级停留时间在30min至2h,在纯二甲苯中应更换2次,总时间则以不超过3h为宜。

材料经过透明,会显示出前一步脱水的效果如何,若脱水彻底,组织则显现透明状态,如组织中有白色云雾状,说明脱水不净,须返工处理,但返工的效果往往不好。

使用二甲苯透明时,应避免其挥发和吸收空气中的水分,并保持其无水状态。

20甲苯的一般性质与二甲苯相似。

用法亦同,唯沸点较低,透明较慢,但不会使组织变脆。

苯的用法同于二甲苯,对组织的收缩作用小,但须警惕其爆炸和吸入而引起中毒。

氯仿适于大块组织的透明。

5.透蜡和包埋包埋用的石蜡,熔点在50~60℃之间,应根据材料本身的硬度、切片的厚薄和当时的气温条件来选用。

一般动物材料最常用的石蜡熔点为52~56℃,植物材料的用54~58℃的;切片薄的用58~60℃的,切片厚的则用52~54℃的;室温10~19℃时选用52~54℃的石蜡可顺利切片,冬季可用熔点46~48℃的石蜡,夏季可选56~58℃的。

石蜡的优劣与切片的成败密切相关。

鉴别石蜡质量的方法是:将石蜡熔化后倒入纸盒使其凝结且无气泡和裂痕,30~35℃放置24h且无气泡和不透明的晶状小点出现,蜡块裂面不呈颗粒状,切成薄片不碎成细粒。

这种石蜡即为品质优良。

含有杂质的新蜡或用过的废蜡可清洁后再用,方法是将石蜡放入锅内,加热到开始冒白烟,然后用小火继续加热30min(注意别超过发火点),使其去除水分和挥发性杂质,并在温箱中过滤以去除灰尘等颗粒。

透蜡须在恒温箱中进行,恒温箱的温度调节至高于石蜡熔点3度,使经过透明的组织块依次用石蜡与二甲苯的等量混合液、纯石蜡处理。

纯石蜡应处理2~3次,透蜡的时间依材料性质而定,一般每次需15~30min。

透明的关键是控制温度的恒定,切忌忽高忽低,温度过低石蜡凝固无法渗透,温度过高使组织收缩发脆。

包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。

具体做法是;先准备好纸盒(具体折法见图1-3及说明),将熔蜡倒入盒内,迅速用预温的镊子夹取组织块平放在纸盒底部,切面朝下,再轻轻提起纸盒,平放在冷水中,待表面石蜡凝固后立即将纸盒按入水中,使其迅速冷却凝固,30min后取出。

包埋用蜡的温度应略高于透蜡温度,保证组织块与周围石蜡完全融为一体。

石蜡的迅速冷却也很重要,否则包埋块中将会产生结晶。

以后切片时引起碎裂。

6.切片(1)石蜡块的固着与整修在包埋以后,就可进行切片。

包埋好的石蜡块装上切片机进行切片前还须进行固着和整修。

固着:一般旋转式切片机上都附有可固着石蜡块的金属小盘,这也可用同样大小的台木替代。

用加热的蜡铲将包埋块粘贴于固着物上,并使组织块朝外,便于以后迅速切出所需的片子。

整修:用加热的蜡铲或刀片将固着的包埋块四周修平,使上下两面修成平行面,常保留组织周围附着宽2~3mm的石蜡,而修好的蜡块呈长方形。

还可削去一角以便于在蜡带上识别切片。

(2)切片机和切片刀切片机是用来作各种组织切片的一种专门设计的精密机械,常用的是旋转式切片机,它的夹物部分是上下移动前后推进的,而夹刀部分则固定不动。

主要部件是安装切片刀的刀台、安装包埋块的标本台和控制切片厚度的微动装置。

切片时切片刀固定不动,转动转轮,标本台上下运动并按调好的切片厚度向前推进一定的距离,组织块上下运动一次,便在刀片上得到一张合乎厚度要求的切片。

切片刀与切片的质量直接相关。

切片前必须磨刀,方法是:将切片刀装上刀柄、刀背夹、滴少许石蜡油在平滑的磨刀石上,将刀贴着磨刀石以背向刀口方向磨,使用完毕后应及时用二甲苯将石蜡油擦净。

(3)切片方法切片前,将刀口置放大镜下观察,选择刀口平整无缺刻的部分来进行切削。

将所要切的包埋块固定在标本台上,使包埋块外切面与标本夹截面平行,并让包埋块稍露出一截。

将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋,上好刀片,使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角,包埋块上下边与刀口平行。

在微动装置上调节切片要求的厚度,调节时应注意指针不可在两个刻度之间,否则容易损伤切片机,将刀台移至近标本台处,让刀口与组织切面稍稍接触,这时就可以开始切片了。

方法是:右手转动转轮,左手持毛笔在刀口稍下端接隹切好的片子,并托住切下的蜡带,待蜡带形成一定长度后,右手停止转动,持另一枝毛笔轻轻将蜡带挑起,平放于衬有黑纸的纸盒内,注意切片速度不宜太快,摇动转轮用力应均匀,防止切片机震动厉害引起切片厚薄不均匀,还应注意转动的方向,以防标本台后移而切不到片子。

切片完毕,应及时用氯仿将切片机的有关部分擦净。

(4)切片中存在的问题及补救方法石蜡切片是很不容易掌握的,有时很容易成功,有时则由于某种因素而造成切片的质量低劣,甚至完全失败。

现将切片时经常遇到的一些缺点、可能的原因以及补救办法列于表1-3。

表1-3 石蜡切片可能产生的问题和解决方法缺 点:石蜡带弯曲不直原 因:1.石蜡块上下两边不平行2.石蜡块的上下两边不和刀口平行3.刀口锋利不一,局部产生差异4.蜡块的一边较另一边为软,或两边的硬度不一致5.材料未居蜡块正中央6.材料大而形不正补 救 办 法 :1.取下台木,将两边修干2.调节标本台,使两者平行3.移动刀片,改用新的刀口4.待蜡块冷却后再切,或重新包埋5.用刀片切去部分石蜡,使材料居中6.在大的一边切去少许石蜡缺 点:切片分离、不能连成带状原 因:1.室温过低2.石蜡过硬3.材料边缘留蜡太少4.刀的角度不适合补 救 办 法 :1.在切片机上方开一电灯或提高室温2.在蜡块面加一层45℃的软蜡或用手指蜡摩擦块面3.重新包埋4.矫正刀的角度缺 点:切片卷起呈圆筒状原 因:1.室温过低2.石蜡过硬3.刀口太钝4.刀的倾角太大补 救 办 法 :1.提高室温2.加软蜡3用毛笔将蜡片摊开压住,切2—3 片即成带4.减小倾角缺 点:切片粘附于切片刀,皱摺在一起原 因:1.室温过高2.石蜡过软3.刀口上留有一层石蜡4.刀口钝补 救 办 法 :1.降低室温2.将蜡块投入凉水中稍浸耒—增加3.切片厚度,改用硬蜡包埋,用二甲苯拭去刀口的石蜡4.磨刀或移动刀口缺 点:切片纵裂原 因:1.刀有缺口2.石蜡块中含有颗粒、杂质3.刀口留有碎屑或细丝4.组织太硬补 救 办 法 :1.可移动刀口2.将颗粒拽去3.清洁刀口4.让包埋块在水中浸泡缺 点:切片有横纹原 因:1.刀和台木的固定螺丝太松2.刀口倾斜度太大3.刀口有石蜡屑补 救 办 法 :1.旋紧螺旋2.可放平1—2。

后再切3.用氯仿拭去缺 点:切片厚薄不匀原 因:1.切片机有毛病2.夹刀不当3,未旋紧标本台螺旋4。

石蜡块过硬补 救 办 法 :1.矫正切片机装置2.对症治疗3.旋紧螺旋4.将石蜡块在水中浸泡缺 点:每张切片厚薄不匀原 因:1.刀口震动,是由于材料过硬2.刀的倾角太大补 救 办 法 :1。

在蜡块表面涂一层火棉胶2.减小倾角缺 点:材料发生裂隙破碎或脱落原 因:1.脱水不干净2.有透明剂残留3.石蜡透入时,温度过高或时间过长4.由于脱水剂和透明剂的影响,使组织变硬发脆5.材料太硬或太粗补 救 办 法 :1.无法弥补2.增加浸蜡时间,重新包埋3.无法补救4.用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明5.在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液 缺 点:切片时发生沙沙声原 因:1.组织块过硬2.包埋温度过高3,材料内留有结晶体补 救 办 法 :1.浸泡水中软化2.无法补救3.无法补救缺 点:石蜡块将蜡带抬起原 因:1.由于摩擦而产生静电荷所致2.石蜡块上面附有石蜡碎屑3.刀口上附有石蜡碎屑补 救 办 法 :1.提高室温2.用刀片将碎屑清除3.用二甲苯或氧仿清除7.贴片切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理,但是切片常有细小的横纹,必须经展平后才能贴附,否则影响染色和观察。

贴片一般有捞片法和烫板法。

捞片法比较简单,首先将切片分割开,投入到48℃的温水浴中,这时切片都浮在水面上,由于表面张力的作用使切片自然展平,然后用涂有甘油蛋白溶液(将鸡蛋一个打破入杯中,去除蛋黄留下蛋白,用筷子充分调打成雪花状泡沫,然后用双层纱布过滤至容器中,加入等量的甘油,混合,最后加入百分之一体积的麝香草酚(thymol)作防腐用,可保存几个月到一年。

)或5%明胶水溶液的载玻片倾斜着插入水面去捞取切片,使切片贴附在载玻片的合适位置,于室温下放置一昼夜后使其彻底干燥。

烫板法,是将涂有粘片剂的载玻片上涂上水,把已分割好的切片贴上去,再置载玻片于35℃恒定的烫板上让切片摊干,并倾斜或用吸水纸吸去水分,最后将载玻片再度放烫板上晾干。

要注意,不管是使用捞片法还是烫板法,所用的载玻片必须洁净,不能有油污(检验法:已涂有粘片剂的载玻片上滴加数滴蒸馏水,若发现水不均匀分散而聚成滴状,即表示载玻片不清洁,有残留油脂等物在上面);切片的光面应朝下,否则染色过程中切片容易脱落。

8.染色组织切片是无色透明的,必须进行染色后才能观察到各种微细结构。

染色方法很多,但是染色剂往往是水溶液,因此切片必须经过脱蜡而再度复水。

这方法即为脱水、透明的逆过程。

由于切片十分菲薄,处理的时间大大减少,一般每级停留约2~5min。

染色是一个复杂的过程,兼有物理和化学作用,对其中的机制目前了解得不很清楚。

研究细胞器和细胞内的重要组分都有很多现成的方法,例如显示DNA的Feulgen反应,显示RNA的Brachet反应,显示多糖的PAS反应,显示蛋白质的Millon反应和显示某些酶的钙—钴法等,可以根据不同的要求来选用。

9.透明染色后的切片须再次经过脱水、透明。

标本经二甲苯透明后,折射率改变,透明度提高,使得染上色的部位更清晰地显示出来。

10.封藏封藏的目的是使制成的切片能够永久保存,封藏剂必须能与透明剂互溶,对染色无影响,折射率近似玻璃和具有粘性的物质,常用的封藏剂有加拿大树胶和中性树胶。

封片的方法是:将载玻片从二甲苯中吸出后,吸去多余的二甲苯,在标本上的二甲苯尚未干透之前加一滴树胶,仔细覆盖上盖玻片,避免产生气泡,也不得拖动盖玻片,以免将标本破坏。

树胶量视盖玻片大小而定,勿使过多过少。

贴上标签,注明材料、染色法,待封藏剂凝固后便成为一张成功的石蜡切片。

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