用表面活性剂的口号集合100句

表面活性剂在石油工程中的应用研究进展论文

摘要：表面活性剂在石油工程的油气钻井、开采及储运中均有很广泛的应用。综述了表面活性剂在石油工程中的研究及应用现状，由于国内一些大型油气藏已到开采后期，油田采收率较低，利用表面活性剂可以提高采收率。高分子类型的表面活性剂既能提高波及系数，又能提高洗油效率，是很好的驱油助剂。目前不少油田在开采低渗透油藏以及页岩油气藏，压裂液助剂的开发研究是现在及将来的一个研究热点。

关键词：表面活性剂；石油工程；应用；研究

表面活性劑是一类分子由极性的亲水部分和非极性的亲油部分组成的，少量存在即能显著降低溶剂表面张力的物质。它们广泛用于日常生活[1，2]，以及石油工程。例如，在油气钻井工作中可以用作钻井液的杀菌剂、缓蚀剂、起泡剂、消泡剂、解卡剂、乳化剂等；在油气开采作业中可以用作黏土稳定剂、驱油剂、清防蜡、酸压助剂（可用于乳化酸、泡沫酸，成胶和破胶、助排剂等）；在油气田地面工程中可以用作减阻剂、破乳剂、杀菌剂、絮凝剂等，于浩洋等[3-6]对其在油田中的主要应用及其作用机理进行过归纳。

目前国内一些大型油藏已到开发后期，原油采收率较低，可以采用化学驱进行驱油。例如，大庆油田的碱-表面活性剂-聚合物（ASP）三元复合驱为大庆油田的增产和稳产作出了巨大贡献[7]。对低孔低渗的油气藏如目前国内外热门的页岩油/气藏的开采则多用压裂工艺，其中关键的化学剂常用到表面活性剂[8-11]。

根据表面活性剂在水中起活性作用的亲水基团来进行分类，可以将其分为阴离子型、阳离子型、两性离子型、非离子型及特种类型（包括含氟和含硅、Gemini、Bola及生物表面活性剂等）表面活性剂。现根据其类型对其在石油工程尤其是在低孔低渗油气藏中的研究及应用现状进行综述，以供我国页岩油/气藏开采技术的研究人员作参考。

1普通表面活性剂的研究及应用

【第1句】：1阴离子型

在水中起活性作用的部分为离子的表面活性剂。常见的阴离子表面活性剂有羧酸盐型（可用作肥皂）、磺酸盐型（可用作洗衣粉）、硫酸酯盐型（可用于牙膏）及磷酸酯盐型（可用于织物的去静电）等[12，13]。

在油田应用中，硫酸酯盐型如十二烷基硫酸钠可用于泡沫及微泡沫钻井液的起泡剂；石油磺酸盐[14]可以将油水界面张力降至超低界面张力（10-3mN/m），用于碱-表面活性剂-聚合物（ASP）三元复合驱，可以极大地提高原油的采收率。

【第1句】：2阳离子型

季铵盐型、吡啶盐型及咪唑啉型等阳离子表面活性剂可用农药、杀菌、缓蚀剂、防静电等；在石油工程中多用作杀菌剂、润湿剂和缓蚀剂，不过使用量不太大。例如，将季铵盐型表面活性剂用于地层的降压增注，效果明显[15]。

【第1句】：3两性离子型

甜菜碱等氨基酸类的两性表面活性剂分子中既有阴离子又有阳离子，在水中由于pH值的不同可以表现出两种类型的电性，可用作驱油剂。

栗原君[16]研究了十六烷基羟丙基磺基甜菜碱在低渗多孔介质中的流动特征及驱油特征，发现低矿化度地层水与甜菜碱溶液与岩石表面作用更强、流动阻力更小，高矿化度水驱、低矿化度水驱的采收率可分别达到【第32句】：5%和【第33句】：8%，而低矿化度水驱加后续低矿化度表面活性剂驱的组合方式可使采收率达最高。

【第1句】：4非离子型

非离子型表面活性剂分子在水中不带电性，故而受水中矿化度的影响非常小，物理化学性质较稳定，例如聚氧乙烯烷基醇醚可用于驱油及原油的破乳等[17，18]。

章杨等[19]研究了壬基酚聚氧乙烯醚系列非离子表面活性剂，利用高温高压可视化泡沫仪对不同温度、压力和矿化度条件下CO2泡沫的性能进行了测试，分析了各因素及聚氧乙烯基的聚合度对CO2泡沫性能的影响。结果表明：EO聚合度越大，表面活性剂的亲水性越强，泡沫性能及稳定性均有所提高；相反，矿化度、压力和温度的升高使泡沫性能下降。

2特种表面活性剂的研究及应用

【第2句】：1含氟/硅型

主要是含氟表面活性剂及含硅类型的表面活性剂。很特殊的既憎水又憎的含氟表面活性剂，可以在冻胶压裂液中作为热稳定性较好的助排剂；含硅表面活性剂如有机硅则是很好的消泡剂，还可以用作驱油剂及冻胶压力液破胶后的返排剂等[20-25]。

例如李凡等[26]以烯丙基聚乙二醇、环氧氯丙烷、含氢硅油和有机胺等作为原料，制备出多种有机硅，其水溶液与胜利油田某区块原油的界面张力可低至0.025mN/m，将其进行CO2驱油实验，可进一步提高【第11句】：44%的原油采收率。

【第2句】：2Gemini（双子、孪生或双生）型

Gemini型表面活性剂是一类双亲水基双亲油基的两亲物质。有较高的界面活性、很低的临界胶束浓度以及较低的Krafft点，具有较好的`增溶、润湿、起泡和钙皂分散作用。在低浓度时其增粘效果显著，有较好的黏弹性和胶凝作用。目前已报道的的Gemini型有磺酸盐型、季铵盐型、二壬基苯酚综合型、甘氨酸衍生物等，除了用于个人护理和其它一些化工用途外，在石油工程中可用于三采及清洁压裂液的增稠[27-30]。阳离子的双子表面活性剂有较好的协同效应[31]。Oliviero等[32，33]研究了双子水溶液的物理化学性质，而朱森[34]研究用计算机模拟双子表面活性剂的性能表征。

唐善法等[35]合成了表征系列羧酸盐双子表面活性剂，可以配制新型低伤害耐温性清洁压裂液，将其与纳米粒子复配成清洁压裂液，黏度测试结果表明疏水链碳数越多，该双子型表面活性剂的增稠能力越强，溶液黏度突变升高对应活性剂浓度越小；疏水链碳数相同时，联结基碳数越多，其增稠能力越强，热稳定性越好；0.04%纳米ZnO可提高高温下的溶液黏度（100℃下由10mPa·s升至30mPa·s）。优化配方有良好的抗高温性能和剪切稳定性，携砂稳定性好且能快速破胶。该清洁压裂液在塔里木盆地致密砂岩气藏的应用效果良好。

3表面活性剂在致密油气藏的研究及应用

单一的表面活性剂固然能降低溶剂的表面张力，但其形成洗油能力较强的胶束、乳液及微乳液的能力较弱，因此在提高原油采收率时多需和多种化学剂复配使用。例如，加入适量的无机盐可以調整乳状液及微乳液的亲水亲油平衡值（HLB值），利于胶束的形成；加入适当的表面活性物质可以减少价格昂贵的表面活性剂的使用。配乳状液及微乳液时，由于油品的来源不同，故而乳化时所需乳化剂的HLB值也不同，若不能研制出合适的表面活性剂，则需要用两种或多种表面活性剂进行复配，调整到油-水乳化所需的HLB值，如此才能配制出稳定的水/油型乳状液或油/水型乳状液，可用于提高原油采收率。

例如，利用阴离子/非离子表面活性剂进行驱油，模拟效果表明，可以显著降低界面张力能力，浓度范围在0.05%～0.30%；热稳定性较好，乳化性能较好，可以使水驱的采收率提高12%左右[36]。

针对致密油气藏，将表面活性剂复配至压裂液中，对比研究发现阳离子表面活性剂改变润湿性的效果较好，若是延长焖井时间，则开井后的产量会有所提高[37]。利用纳米乳液针对超低渗透油藏利用纳米乳液进行降压增注，不仅可以降低油水界面张力，还可以提高原油采收率[38]。

邱正松等[39]针对页岩储层的水敏等储层伤害问题，采用两步稀释法，研备出极小粒径且分散性好的水包油型纳米乳液。选取Gemini季铵盐型表面活性剂与Tween80等复配。

罗明良[40，41]等以氨基聚硅氧烷和绿色表面活性剂脂肪酸甲酯磺酸钠合成，得到致密气井压裂控水性良好的纳米乳液。纳米乳液的液滴中值粒径平均为【第28句】：5nm。其中的氨基、硅氧烷与硅氢键等极性基团通过物理化学吸附作用可以牢固吸附到岩石表面，分子链中的疏水基团硅甲基可以改变岩石表面的润湿性。

4结论

石油工程中钻遇的储层有时会很复杂，现有的表面活性剂不太适用，目前主要的研究热点是环保型表面活性剂的研制及作用机理的研究，用于驱油及压裂的新型表面活性剂及其作用机理的研究。例如，任立伟[42]提出钻井液用表面活性剂今后的研究工作应充分利用表面活性剂之间的协同效应，提高表面活性剂的抗温、抗盐及抗钙的能力，尽量开发出环保产品如烷基糖苷类，以及双子型表面活性剂及含硅或氟等的新型表面活性剂，还要注重各种类型表面活性剂的作用机理的研究。对于开发后期的油气藏，采用化学驱进行驱油时的驱油机理由于采用的化学剂的不同，尤其是新型化学剂（如有机碱、生物表面活性剂等）的应用，其作用机理还有待进一步研究[7]。辽河、新疆油田等一些稠油油藏可以利用乳状液驱油，但是采出液及采出水的破乳是个难题，有必要针对复配表面活性剂及用有机碱稳定的稠油O/W型乳状液的破乳脱水进行研究[43]。对于国内外较热门的页岩油/气的开采，即特低渗油气藏的开发，表面活性剂的作用机理还需加大研究。例如，对胜利油田某区块的特低渗岩心进行的驱替研究表明[44]，表面活性剂可以显著降低最小（拟）启动压力梯度，且其浓度对含水饱和度的影响较大。

石油工程毕业论文

【文章导读】石油被誉为工业的“血液”，是石化工业原料，是重要战略物质。中国想要走向工业化，实现经济目标离不开石油，甚至国防建设与人民生活也离不开石油下面是小编为您整理的石油工程毕业论文，供您参考和借鉴。

摘要  工程造价管理是石油工程建设单位对投资进行的估算、编制石油工程发包项目标的、石油工程的决算和工程施工企业在努力争取建设市场工作量时进行科学定价投标的重要工具。本文主要分析了当前石油工程建设在造价管理方面存在的一些问题，并提出了如何加强石油工程建设造价管理有效对策，建立以石油工程项目管理为中心的工程造价管理体系;建全科学完善的造价运行机制和管理体制等。

关键词  石油工程;工程造价;管理方法;改进措施

【第1句】：石油工程建设造价管理现存在的问题

【第1句】：1石油工程造价管理体系单一，使石油工程建设企业缺乏市场竞争力

我国石油工程建设企业内部存在长期的自行循环特点，石油工程项目很多都是在行业内部自行进行设计、自行进行投资计划的编制，石油工程建设企业内部主要注重石油工程投资额编制工程的预算造价，使得现行的使用工程项目计价体系具有相对比较重的工程计划经济和工程垄断性，尽管政府相关石油工程造价管理部门实施了一些有针对石油工程造价管理的政策，但是对石油企业工程项目的造价模式没带来任何的影响，不但没有将投资降下来，还经常遭受国家审计部门的质疑，同时还造成我国石油工程建设企业在市场中缺乏竞争力。

【第1句】：2轻视石油工程设计的经济价值，不能有效的控制石油工程建设造价

近年来，我国石油工程建设在工程造价控制方面大多都是将注意力集中在石油工程施工组织和工程发包上，侧重的是石油工程项目建设的后期阶段甚至是石油工程的决算阶段，使得有些石油工程项目在建成后出现投资量大幅超过了计划的造价，石油工程项目建成后评估效益不好。个人认为其主要的原因是石油工程在设计阶段就缺少一定的经济价值。一方面我国的石油工程建设大多数是自成体系，同时也包括石油工程的设计业务，缺乏石油工程设计招标的竞争模式，因此，我国就出现了重功能设计而轻视石油工程设计的经济价值的现象，造成石油工程在设计阶段就没有明确的工程造价控制责任。另一方面普遍忽视石油工程项目建设前期阶段的重要性，使得经常出现所谓的“三边”石油工程，在客观上体现了工程决策的草率，石油工程造价通常都是在工程竣工后进行算账，控制工程建设投资没有发挥其作用。

【第1句】：3严重缺乏石油工程建设企业工程造价控制管理人才

目前，我国石油工程建设施工企业的造价管理大多都是由经营管理部门或市场开发部门进行管理，而这些部门的业务人员或者是业务部门的相关负责人通常都是“门外汉”，经常出现官僚签字、拿意见拍“脑门子”的腐败现象。另外，从事石油工程造价管理的相关业务人员很多都是“无证上岗”，有些业务人员虽然取得石油工程造价师执业资格，但缺乏综合素质或者是缺乏承担石油工程责任的能力，缺少具体的`实践经验和实际工作能力，甚至有的石油工程造价业务人员在其领导的主观意见下进行工程预算的编制。因此，迫切需要一大批能够为石油工程项目投资、石油工程造价控制管理提供科学有效的决策依据的具有较高素质综合型石油工程造价专业人才，并强化石油工程造价管理的职能。

【第2句】：加强石油工程建设造价管理的对策

【第2句】：1充分认识石油工程建设造价管理的重要意义

我国石油工程建设企业和施工企业经济活动的重要组成部分是石油工程造价管理，处于工程管理的核心地位。它是石油工程建设单位进行工程投资估算、编制发包项目标的以及工程决算的关键环节;是石油工程施工企业能够争取建筑市场工作量时进行科学定价投标的重要工具;是石油工程施工企业对工程整体实行工程实施计划管理、编制石油工程施工作业计划的依据;是优化石油资源配置、是搞好石油工程施工项目管理、是实行石油工程项目全面经济核算、是将石油工程施工成本最大化的降低、向工程作业单元向施工企业签发施工任务书的重要依据;是用工程定额组织生产、开展经济活动分析和计算经济效益的基本依据。因此，石油工程造价管理是石油工程建设单位和施工企业不可缺少和不可替代的工程管理手段，只能对其不断的进行强化和完善。

【第2句】：2建立完善以市场为导向的造价控制机制

以市场为导向的石油工程造价控制，就是通过市场竞争进行优胜劣汰，达到控制石油工程造价的目的。众所周知，在石油工程施工企业中降低石油工程项目成本、控制石油工程造价最有效的途径就是坚持规范的石油工程招标。因此，一是要坚持工程设计招标，以石油工程标准设计和工程限额设计作为根本依据，并在具体的石油工程设计中运用价值工程，将石油工程功能设计进行优化，将多中设计方案进行比较，综合衡量石油工程设计成果的实用性、先进性以及经济性，从源头保证石油工程项目在设计过程中坚持科学和客观性，避免那种由于指定石油工程设计单位进行授意性设计，形成石油工程设计单位与工程施工企业成为一个利益共同体的现象;二是坚持石油工程建设项目造价的第三方监督，石油工程建设单位应委托石油工程造价咨询机构进行工程造价的审核，要求其对石油工程造价进行合理的评估，对石油工程合同价的工程量清单、单价及有关文件进行详细的审核，指导石油工程建设单位对施工组织设计进行合理的优化。

【第2句】：3建立完善以项目管理为中心的工程造价管理体系

有效控制石油工程建设投资非常重要的一个环节就是石油工程造价管理，如同工程项目管理一样搞好石油工程造价全过程控制是一项复杂的系统工程。只有将石油工程造价管理人员与工程设计、工程监理以及工程施工等有关各方进行密切的配合，共同对工程进行监管，才能不断提高石油工程造价的管理水平，使石油工程造价管理工作对石油工程建设项目投资的合理控制乃至对石油工程施工企业的促进作用得到充分发挥。

【第2句】：4建立并完善石油工程造价管理人员培养机制

加强对石油工程造价专业人员进行专业知识和职业道德的教育，是保证石油工程建设造价管理工作能够不断发展的重要基础。由于石油工程造价管理在石油工程建设项目中和各方有着非常密切的经济利益关系，且对全社会的经济活动起着一定的导向作用，它要求石油工程造价专业技术人员应首先具备非常广泛的专业知识，同时除了掌握过硬的专业技能外，还应对石油工程设计内容、工程的设计过程、工程的施工技术、工程项目的管理以及工程涉及到的经济法律法规等都要有全面而深刻的了解，更需要具有崇高的职业操守。

【第3句】：结束语

总而言之，随着我国石油工程造价管理工作的不断深入开展，我国对石油工程造价分析就显现尤其的重要。在实际工作中只有全面了解石油工程造价的特殊性，只要充分利用详细的基础资料和科学的分析方法才能准确的得到石油工程造价的分析结论，促进我国石油工程造价管理工作水平的整体提高。

参考文献

[1]毛宏鹏.如何做好油田地面建设工程的施工项目的管理[J].中国石油和化工标准与质量.2013

[2]王有青.浅谈通过加强石油工程定额管理来提高企业效益[J].中国石油和化工标准与质量.2011

[3]孙晓斌.试论石油工程造价分析及其应用[J].胜利油田党校学报.2010

[4]李青松.石油企业工程建设造价管理方法研究[J].胜利油田职工大学学报.2011

项目合同石油工程论文

【第1句】：石油工程项目合同管理的特点

【第1句】：合同管理持续时间长

合同的形成和履行是一个持续过程，因此，合同管理必然在项目周期内长时间连续地、不间断地进行，它不仅包括施工期，还包括招投标和合同谈判以及保修期，一般时间持续１—２年，长的可达５年或更长时间。

【第2句】：合同管理对工程经济效益影响很大

由于石油工程项目规模大，合同价格高，合同管理对经济效益影响很大。据相关统计，对于正常的工程，合同管理成功和失误对经济效益产生的影响之差能达工程造价的20％。

【第3句】：合同管理影响因素多、风险大

由于石油管线及站场类项目的复杂性，使合同关系越来越复杂、合同管理受外界环境的影响大，并且许多因素难以预测，不能控制，容易造成经济损失，使合同管理极为复杂、繁琐，也充满风险。

【第2句】：石油工程项目合同管理要点

【第1句】：合同管理的前期工作

石油工程总承包企业在决定对某个项目投标之前，要对该项目进行彻底的了解，了解内容大致包括业主资质、项目资金、项目立项、业主需求、资金给付等。在对项目的基本情况了解并决定投标后，为了获得更高的中标率，造价人员首先要对工程所需当地主要材料、劳动力供应数量及价格、社会化协作条件和当地物价水平等做到准确了解、掌握，这样有利于投标书的编制。其次，造价人员应到当地建设主管部门、税务主管部门、会计师事务所进行咨询，对项目所在地的经济、文化、法规等进行全面的了解。接下来要做的就是对业主提供的招标文件进行仔细研读，因为招标文件中包含业主针对合同总价风险控制方法、付款方式、结算方式、质保金及保修服务条款等等内容分，总承包方掌握这些内容后，就可以从业主的要求出发，编著投标书、确定工程预算，只有符合业主的要求才能中标，签下合同。

【第2句】：合同谈判与鉴定阶段的管理

合同的谈判有两个方面：一方面是与甲方的谈判，一方面是与供货商或服务商的谈判。以公司瑞丽站项目为例，在与甲方（中缅EPC第五合同项目部）签订瑞丽站桩分包合同时，本着“为公司追求利益最大化”的态度选择适合我方的合同类型（综合单价），在合同主要条款约定上与甲方人员多次磋商，力求做到公平、公正、互惠共赢，并及时向公司汇报沟通。在与材料供应商、设备租赁商和技术服务商签订现场材料、机械、服务合同时，严格执行上级公司和公司内部的合同管理细则。坚持做到所有款项的支付都以合同为依据通过公司财务，如超过固定金额的支付限额时及时签订相应补充合同。截止2023年5月，公司所承建瑞丽站总图部与业主方共签订2份合同；与分包商签订共计签订合同140份（含10份补充合同），其中技术服务合同5份，材料采购合同125份，租赁合同3份，供电合同1份，加工定做合同1份，其它合同5份。

【第3句】：合同履行阶段的管理

(1)建全合同管理台账和归档制度建全合同管理台账和归档制度，对合同编号、标的类别、标的名称、双方当事人、标的的规格和数量、交付期限、执行记录等情况进行登记，以便随时掌握合同订立及履行情况；对已经生效的合同要编号登记，逐个建立档案，与合同有关的文书也要附在合同卷内归档；履行完毕的合同按档案保管期限保管。(2)通过合同管理实现成本控制目前项目进场的所有供应商和服务商都是通过单一采购、竞争性谈判、多家比选等方法确定。作为现场经营管理人员，全程参与公司瑞丽站项目物质采购定价，服务商比选等工作。选择服务商或供应商在谈价时，严格以公司与业主签订合同中的综合单价为准绳，结合实际人、材、机的测算后，在保证公司利润的前提下再寻找最优合伙商，最后对合同细则进行谈判。加强与现场管理人员的沟通，做好合同内、外工作量的界定，定期到工地巡视并核对。每天归集入场材料和定期更新各服务单位的工程进度（统计一手资料），为拨付进度款和后期结算提供依据。在施工前确定各分部分项工程的目标综合单价，定期将目标综合单价和实际综合单价定期对比、分析、如出现偏差，及时制定方案纠偏、通过现场精细化管理，准确收集数据分析进而提高成本控制力度。(3)签订补充合同瑞丽站项目特殊性、施工和设计同时进行等原因，前期施工图纸未能及时到位，加上石油单位合同定理繁琐，为不影响资金拨付和工程进度、部分合同的签订都是暂定工程量，导致后期大量服务合同都签订了补充合同。(4)加强合同变更管理瑞丽站的初设与竣工图纸差距太多，公司所承包的总图与建构筑物部分存在很多的现场变更及合同外变更，需要做好现场签证单并收集好各项附件。如瑞丽站的初设地基处理为灌注桩，施工前变更为振冲碎石桩，作为这类金额较大的'设计变更需要多次配合业主代表、监理代表等相关人员上报变更预算、变更施工方案，做好变更合同的解释工作。

【第4句】：协助做好供方材料、构配件和设备管理

协助公司其他管理职能部门收集产品信息和选择产品供方。合同立项前期要求供方提供生产经营资质，证明是经国家工商部门批准、颁发营业执照的生产企业或经销商。瑞丽站采购范围主要有钢材、水泥、砼、机砖、砂子、石子、防水材料、主要装饰材料及安装用零和电料、电器、五金、工具、计量器具、电焊条及一般装修材料等，对各类物资供方的供货和服务情况作记录（包括产品质量、价格、服务等），同时便于今后在其他项目中对同类供货商进行比选。

【第5句】：EPC工程总承包项目合同收尾管理

在EPC工程总承包项目合同收尾阶段，还应当对合同管理进行评估，通过对合同管理的评估，我们可以对整个项目的全过程：准备阶段--执行阶段-收尾阶段进行分析，对其中好的管理工作经验进行总结，从而为下次管理提供优势，对不好的管理工作进行改进。在评估工作中重点评估以下内容：合同签订情况的评估：

(1)合同目标同实际完成情况的比较；

(2)投标报价同实际工程价款的比较；

(3)测定的成本目标同实际成本的比较。合同执行情况的评估：

(1)在合同管理过程中对风险的应对是否合理

(2)合同管理过程中存在无法根据合同解决的问题，对这些问题要特别注意，并要防治其发生。

基因工程在林木抗寒中的应用研究论文

摘要：文章综述了基因工程在林木抗寒方面的研究进展，包括结构基因、顺式作用元件、转录因子和转基因技术。

关键词：基因工程；林木；抗寒；

逆境会伤害植物，严重时会导致死亡。当温度下降到0℃以下时，植物体内发生冰冻，因而受伤甚至死亡，这种现象称为冻害。树木在生长期中如遇到温度的突然变化，会打乱植物生理进程的程序而造成伤害，迄今为止，尚没有解决低温冻害的根本办法。随着基因工程的发展，在树木的抗寒性研究方面取得了进展。本文就结构基因、顺式作用元件、转录因子和转基因技术在林木抗寒中的应用与研究进展进行了阐述，以期为林木抗寒相关研究提供参考。

1结构基因

结构基因是一类编码蛋白质的基因，大多数真核生物的基因是不连续基因。所谓不连续基因就是指基因的编码序列在DNA分子上是不连续的，被非编码序列所隔开。编码的序列称为外显子，是一个基因表达为多肽链的部分；非编码序列称为内含子，又称插入序列。内含子只转录，在前mRNA时被剪切掉。一些抗寒相关的结构基因，通过转录形成RNA，再通过翻译形成相关的蛋白质，进而表现出抗寒的特性。2003年，李春霞从胡萝卜中克隆得到抗冻蛋白基因，并转入山杨，得到转基因植株后经PCR检测获得1株卡那霉素的转基因株系，结果表明目的基因AFP基因已被整合进山杨基因组中[1]。2007年，Benedict等将拟南芥抗寒相关基因CBF1基因转化到杨树基因组中，并证明该基因的成功表达可提高杨树的抗寒性。

2顺式作用元件

顺式作用元件，位于结构基因的旁侧，包括启动子、增强子、应答元件。它是转录因子的结合位点，并通过这种结合进而调控下游基因转录，确保转录的精确起始和转录效率。目前此方面在林木中研究较少，相对滞后。此外，Li等[2]研究表明不同基因启动子对抗逆基因的表达作用不同，其中cor15基因启动子要弱于cor15b基因启动子对抗逆基因表达活性的影响，此外还发现这种影响不仅与顺式作用元件种类有关，也与其数量密切相关。Khurana等[3]发现CCAAT—box和HSEs作为小分子热激蛋白sHSP26启动子中重要的热激元件在表达调控中起了决定性的作用。

3转录因子

转录因子即能够结合在基因上游的特异核苷酸序列上的蛋白质，并能调控该基因的转录。转录因子可以调控核糖核酸聚合酶（RNA聚合酶，或叫RNA合成酶）与DNA模板的结合。同时在与该基因上游的启动子区域结合的同时，转录因子还可以与其他一些转录因子形成转录因子复合体，进一步影响基因的转录，进而影响蛋白质的合成。2023年，罗梦雪等[4]从麻疯树基因组中克隆到一个CBF2基因（命名为JcCBDF2）。运用生物信息学的分析手段对该基因序列及其编码的蛋白质序列进行了分析，结果表明，JcCBDF2蛋白中不止包含AP2/EREBP保守的结合结构域，还具有CBF转录因子特征序列。实时荧光定量结果显示基因主要在麻疯树叶片内转录表达，对低温胁迫极其敏感，初步研究表明基因是低温诱导型转录因子。赵天田，王贵禧，梁丽松等[5]根据平榛花芽转录本高通量测序的结果，采用RACE—PCR技术克隆到平榛S4OQ基因，并对基因进行实时荧光定量表达分析，表明：平榛雌花芽中的表达量最高，随后表达量逐渐下降，在不同器官中的表达具有差异性，雄花序中表达量最高。杨杞，白肖飞，高阳等[6]以沙冬青为试验材料，利用RT—PCR和RACE技术克隆了沙冬青CBF/DREB1基因cDNA序列，并对其进行了序列分析，运用生物信息学预测其编码的氨基酸序列具有CBF家族基因特有的AP2结构域。为进一步研究植物抗逆和获得抗性基因提供了新的候选基因。

4其他

4。1小G蛋白基因

小G蛋白分子量约为20—30KD具有GTP酶活性，在多种细胞反应中起开关作用。当小G蛋白与GTP结合时成为活化形式，作用于下游分子并将其活化。当GTP水解成为GDP时，小G蛋白恢复为非活化状态。黄亚成等[7]从橡胶树胶乳cDNA文库中克隆1个小G蛋白的基因全长，进行了聚类和表达分析，采用实时荧光定量的方法研究该基因低温处理下的表达水平。结果显示4℃低温胁迫下该基因在橡胶树幼苗根中的表达明显受诱导且在胁迫初期表达最强，后又有所下降，为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

4。2microRNA

microRNA（或miRNA）是指参与转录后基因的表达调控，由内源基因编码的非编码单链RNA分子，长度约为22个核苷酸。目前，关于MicroR—NA的调控机理还不太清楚。2012年，张译云[8]以毛白杨为材料，进行不同时间段（0、【第8句】：【第14句】：20h）的低温胁迫（4℃）处理，分别提取小片段RNAs（<200nt），利用实时定量PCR技术研究毛白杨在低温胁迫后12种miRNAs的差异表达规律。结果显示，miRNAs的.表达在低温胁迫下有显着变化，且呈现动态反应。在低温胁迫下，大部分miRNAs的表达受到抑制。miR168a、miR169ac、miR394a—3p、miR530a的表达量在各个时间段显着下调。表明，miRNAs在调控毛白杨对低温胁迫的反应中起着重要作用。2012年，张译云以毛白杨为试材，通过构建microRNA的cDNA文库，经高通量测序获得144个保守microRNA和29个新microRNA，并用生物信息学方法预测了新microRNA的101个靶基因，且这些靶基因均与植物生长或逆境胁迫密切相关。该研究对进一步探讨microRNA在毛白杨经低温胁迫后的调控机制具有重要意义。

5林木抗寒展望

目前，抗寒性研究是林业抗逆性研究中重要一项，并已深化到基因水平。虽然转基因技术存在一定的争议而且植物抗寒性状作为质量性状多受多基因控制，抗寒分子机制相对复杂，目前对这方面的研究仍不够透彻，经基因转化获得的抗寒性植株还有很大的盲目性。但利用转基因技术增加林木抗寒性，并不涉及食品安全问题，同时一些寒冷胁迫应答基因已陆续被鉴定，很多关键基因已通过转基因技术成功提高了林木的抗寒性。近年来，在大数据时代的潮流中，基因芯片、转录组等高通量生物技术的成功应用进一步加快了抗寒相关候选基因的鉴定，因此运用基因工程技术改善植物抗寒性将拥有越来越好的前景。

参考文献

[1]冯连荣，宋立志，林晓峰。杨树抗寒育种研究进展[J]。防护林科技，2010（1）：92—94

[2]LiF，HanYY，FengY，etal。ExpressionofwheatexpansindrivenbytheRD29promoterintobaccoconferswater—stresstolerancewithoutimpactinggrowthanddevelopment[J]。Biotechnol，2013，163（3）：281—291

[3]KhuranaN，ChauhanH，KhuranaP。WheatchloroplasttargetedsHSP26promoterconfersheatandabioticstressinducibleexpressionintransgenicArabidopsisplants[J]。PLOSOne，2013，8（1）：e54418

[4]罗梦雪，高继海，时小东，等。麻疯树耐冷基因JcCBF2的克隆及表达模式分析[J]。四川大学学报，2023，51（6）

[5]赵天田，王贵禧，梁丽松，等。平榛ChWRKY2转录因子的克隆及在低温胁迫下的表达分析[J]。林业科学研究，2012，25（2）：144—149

[6]杨杞，白肖飞，高阳，等。沙冬青CBF/DREB1转录因子的cDNA克隆及序列分析[J]。基因组学与应用生物学，2009，28（6）：1043—1048

[7]黄亚成，秦云霞，刘林娅，等。橡胶树HbRAN1基因的克隆与表达[J]。热带作物学报，2013，34（7）：1257—1263